"Гиппократ" официальный
представитель компании
Ирис в России

Ответим на все вопросы по телефону 8 8652 211-747

Врач консультант с 10:00 до 22:00 +7 999 201-12-95

Исследование №6

Определение специфической активности Биологический активной добавки БАД ЛайфЛивер220

“9” апреля 2003 г.
Тема № 09-04/03
Определение специфической активности Биологический активной добавки (БАД)
ЛайфЛивер220
(Отчет)

1. Определение специфической активности препарата (БАД) ЛайфЛивер220

Согласно рекомендации авторов, препарат (БАД) ЛайфЛивер220 предназначен для помощи при лечение гепатитов. В связи с этим была избрана модель гепатита, вызываемого четыреххлористым углеродом – ССL4.

Методика. Под наблюдением 14 кроликов, разделенных на 2 группы: I группа экспериментальная – 10 кроликов, II группа контрольная – 4 кролика. Все животные содержались в условиях вивария на стандартном пищевом рационе.

После определения исходных параметров, животным натощак вводили через зонд в желудок четыреххлористый углерод- CCL4 в количестве 0,5 мл. Введение CCL4 производили 2 раза в неделю в течение 4 недель. По окончании этого срока 2-х кроликов подвергли эвтаназии путем декапитации для точного установления степени развития экспериментального гепатита. Затем начинали лечение путем ежедневного введения суточной терапевтической дозы средства «ЛайфЛивер220» рег os. Суточная доза составляет 9,84 мг/кг.

Для точной дозировки испытуемого средства его вводили строго согласно индивидуальной массы тела животных. В таблице №1.1. приводим характеристику использованного материала.

характеристика использованного материала.

Таблица №1.1.

порода

пол

масть

масса тела (г)

Реактальн темп. (°С)

1

шиншилла

самец

черный

2,900

38,4

2

шиншилла

самец

рыжий

1,590

38,2

3

шиншилла

самец

белый

1,700

38,2

4

шиншилла

самка

бабочка

1,800

38,0

5

шиншилла

самка

белая

1,720

38,0

6

шиншилла

самка

белая

1,840

38,0

7

шиншилла

самец

серый

1,620

38,0

8

шиншилла

самка

бабочка

1,540

38,2

9

шиншилла

самец

белый

1,500

38,0

10

шиншилла

самец

белый

1,490

38,0

Результаты исследования. После шестого введения CCL4 животные становятся менее активными, однако безусловные рефлексы и реакция на внешние раздражители сохраняются на исходном уровне. В последующие дни та же картина сохраняется, нарастает адинамия, вялость реакции на внешние раздражители и удлинение латентного периода безусловных реакции. Поглощают преимущественно только овощи и зелень, сухой корм не поглощают, много пьют.

Через 24 часа после VIII введения CCL4 подвергнуты эвтаназии путем декапитации два кролика (№ 1 и 10) для контроля за созданием экспериментального гепатита.

Патоморфологический подтверждено наличие поражения печени в обоих случаях. Для примера приводим патоморфологические и гистоструктурное исследование декапитированных кроликов №1 и 10.

В связи с идентичностью картины приводим протокол кролика №1.

Плевне и брюшина сильно выраженным сосудистым рисунком, тусклые, грязно- темного цвета, кровоизлияний нет, жидкость в полостях не обнаружена. Сердечная мышца дряблая, полости растянуты, со сгустками крови темно- вишневого цвета. Легкие ярко малинового цвета, воздушные, вздутые; эмфизема хорошо выражена особенно по краям. На разрезе вытекает пенистая жидкость. Печень увеличена, плотная, капсула натянута, грязно- темного цвета, тусклая, влажная. На разрезе соскоба не дает. Селезенка: дряблая, тусклая. Почки грязно- серого цвета, поверхность влажная. Мочевой пузырь полный, моча прозрачная.

Гистологическая картина: сердечная мышца – набухание саркоплазмы, поперечно- полосатая исчерченность сглажена, стазирование крови во всех кровеносных сосудах, как макро- так и микроциркуляторного русла. Местами пикноз ядер. Встречаются участки с лимфоцитарными инфильтратами. Легкие- расширение и гиалиноз альвеол, микротромбирование и стаз в микроциркуляторном русле, множественный участки кровоизлияний, перибронхиальная лимфоцитарная инфильтрация, некроз и слущивание бронхиального эпителия. Селезенка- явления отека и стаза, разволокнение структур, некролиз лимфоцитов как в белой так и в красной пульпе. Почки- разволокнение структур и отек стромы. Стазирование крови в микроциркуляторном русле и микро тромбоз.

Набухание и гиалиноз эпителия слизистой извитых канальцев, пикноз и кариолиз ядер, некролиз эпителия. Расширение пространств Щумлянского- Боуменовых капсул, тромбирование капилляров и гломерул и некротические изменения. Печень – отек стромы и дискомплексация балок, стазирование крови в микрососудах и микротромбирование, некроз гепатоцитов, местами вакуолизация и гиалиноз цитоплазмы, кариопикноз, инфильтрация лимфоцитами, полиморфно ядерными лейкоцитами, расширение портальных трактов.

Тут же начато лечение 5 кроликов (№ 2,3,4,5,6)

Суточной терапевтической дозой средств “ЛайфЛивер220”, то есть, 9,84 мг/кг в виде 0,656 % раствора по 1,5 мл/кг. Срок лечения 9 дней.

1.1. Состояние интегральных показателей.

Динамику изменения массы тела и ректальной температуры кроликов в ходе определения специфической активности препарата (БАД) ЛайфЛивер220 приводим в таблицах №1.1.1. и 1.1.2.

Динамика изменения массы тела (г) кроликов в ходе определения специфической активности препарата (БАД) ЛайфЛивер220.

Таблица 1.1.1.

Исходно

Дни введения CCL4

дни после нач. лечения

14-й

28-й

примечание

5

10

1

2900

2700

2600

Эвтаназия

----

----

2

1690

1650

1650

Нач. лечение

1790

1920

3

1780

1720

1700

Нач. лечение

1740

1960

4

1800

1790

1790

Нач. лечение

2000

2060

5

1720

1700

1690

Нач. лечение

1760

1880

6

1840

1820

1800

Нач. лечение

1840

1950

M

1955.0

1880

1871.2

----

----

1826

1954

±m

163.35

138.6

130.86

----

----

33.84

22.8

P

----

----

----

 

>0.1

>0.1

Контроль

7

1620

1610

1640

без лечения

1600

1460

8

1540

1500

1490

без лечения

1440

1420

9

1500

1520

1500

без лечения

1490

1440

10

1490

1460

1310

эвтаназия

----

----

M

1537.5

1522.5

1485

 

 

1510

1440

±m

30.60

31.32

93.60

 

 

58.00

11.60

P

----

----

----

 

 

>0.1

>0.1

Динамика изменения ректальной температуры (°С) в ходе определения специфической активности препарата (БАД) ЛайфЛивер220.

Таблица 1.1.2.

Исходно

Дни введения CCl4

Дни после нач. лечения

14-й

28-й

Примечание

5

10

1

38.4

38.2

38.0

эвтаназия

----

----

2

38.2

38.2

38.0

нач. лечение

38.2

38.0

3

38.2

38.2

38.2

нач. лечение

38.0

38.2

4

38.0

38.0

38.0

нач. лечение

38.0

38.0

5

38.0

38.2

38.2

нач. лечение

38.2

38.4

6

38.0

38.0

38.0

нач. лечение

38.2

38.0

M

38.1

38.1

38.0

----

----

38.1

38.1

±m

0.05

0.04

0.05

----

----

0.03

0.05

P

----

----

-----

 

>0.1

>0.1

Контроль

7

38.0

38.0

38.0

без лечения

38.0

38.2

8

38.2

38.2

38.2

без лечения

38.0

38.0

9

38.0

38.0

38.0

без лечения

38.2

38.2

10

38.0

38.0

37.8

эвтаназия

----

----

M

38.1

38.1

38.0

----

----

38.1

38.1

±m

0.04

0.04

0.04

----

---

0.03

0.04

P

----

----

----

 

 

>0.1

Общее состояние животных по окончании введения CCL4 следует характеризовать как обще угнетённое: спонтанная двигательная активность кроликов отсутствовала, животные вялые, адинамичные, тургор ушей и кожных покровов ослаблен, безусловные рефлексы с большим латентным периодом, реакции на внешние раздражители ослаблены, животные не сопротивляются проводимым манипуляция. Корм потребляют вяло, преимущественно овощи и зелень, много пьют.

После начала лечения, уже на пятый день отмечается значительное улучшение внешнего вида и поведения животных: появилась спонтанная двигательная активность, сопротивление в ответ на проводимые манипуляции. Тургор ушей и кожи повысился, безусловные рефлексы и реакции на внешние раздражители стали живее, их латентные периоды стали короче.

На 10 день от начала лечения, кролики не отличались по интегральным показателям от исходного состояния: спонтанная двигательная активность достаточная, ориентировочная реакция выражена хорошо, тургор ушей и кожи достаточный, безусловные рефлексы и реакции на внешние раздражители адекватные с коротким латентны периодом нормальной высоты. Корм поедают охотно, пьют умеренно.

Т.о. наблюдения за интегральными показателями дают основания считать, что пероральное введение средства ЛайфЛивер220 улучшает общее состояние и нормализирует поведение животных с экспериментальным гепатитом.

 
1.2. Состояние гематологических показателей.

Методика. Определение показателей периферической крови производили по общепринятой методике:

А) определение количества гемоглобина- гемометром Сали;

Б) определение количества эритроцитов и лейкоцитов- пробирочным методом, предложенным Н.М. Николаевым с последующим подсчетом в камере Горяева;

В) определение процентного соотношения форменных элементов белой крови в мазках, окрашенных краской Романовского- Гимза;

Г) определение скорости оседания эритроцитов в аппарате Панченкова;

Результаты исследования. Результаты проведенных исследований приведены в таблице № 1.2.1.

Динамика изменения показателей (M±m;P) периферической крови кроликов, получивших CCL4 и леченных препаратом (БАД) ЛайфЛивер220.

Таблица № 1.2.1.

Показатели

Исходно n=10

После введения CCL4

С лечением n=5

Без лечения n=3

Гемоглобин %

62±3.30

51±2.74; <0.05

37±4.32; <0.01

Колич. Эритроц. (в 1 )

4.6±0.62

3.8±0.91; >0.1

2.6±0.81;<0.05

Колич. Лейкоцит. (в 1 )

5.1±0.60

8.9±1.12;<0.01

12.4±0.79; <0.001

СОЭ (мм/ч)

3±0.71

3±0.80;>0.1

2.0±1.14;>0.1

Процентное соотношение форменных элементов Лейко формулы

Базофилы

0.5±3.30

0

0

Эозинофилы

1.5±0.03

1.5±0.02;>0.1

2.0±0.01;>0.1

Палочкоядерные

1.2±0.07

2.2±0.11;<0.01

3.1±0.13;<0.01

Сегментоядерные

54.3±1.18

55.6±2.48;>0.1

49.4±4.83;>0.1

Лимфоциты

40.3±1.06

37.0±2.19;>0.1

43.5±3.07;>0.1

Моноциты

2.2±0.01

3.7±0.09;>0.05

2.0±0.08;>0.1

Как видно из таблицы №1.2.1. в результате введения CCL4 без последующего введения препарата (БАД) ЛайфЛивер220 у кроликов развилась значительная анемия, с резким снижением гемоглобина и количества эритроцитов при одновременном высоком лейкоцитозе.

Лейкоцитоз сопровождался увеличением палочкоядерных элементов, иначе говоря имелись на лицо явления угнетения эритропэза при наличии усиления лейкопоэза, в частности, раздражение миэлопоатического ростка красного костного мозга.

Введение с лечебной целью препарата (БАД) ЛайфЛивер220 значительно смягчило картину: степень анемизации существенно меньше, уменьшено по сравнению с исходом лишь количество гемоглобина, лейкоцитоз выражен меньше, также как и незначальное увеличение палочкоядерных нейтрофилов.

Сопоставление приведенных результатов свидетельствует о том, что в условиях существенной патологии печени средство “ЛайфЛивер220” способствует восстановлению гемоглобина- образовательной функции печени и устраняет в значительной мере токсическое влияние CCL4 на красный костный мозг.


1.3. Состояние иммунологических показателей.

Методика. Для оценки влияния препарата (БАД) ЛайфЛивер220 на клеточный иммунитет использовали реакцию определения фагоцитарной активности нейтрофилов к золотистому стафилококку.

Исследуемую кровь смешивали с цитратом натрия и 1 миллиардной суспензией 24 часовой культуры лабораторного штамма (209) золотистого стафилококка в соотношении 2:1:1.

Полученную смесь ставили в термостат при 37°С на 0.5 часа, делали мазки, фиксировали в р-ре Никифорова, и красили по Гимзе- Романовскому. Определяли процент фагоцитоза и фагоцитарное число, т.е. число нейтрофилов, поглощающих микробы, и число микробов, поглощённых одним нейтрофилом.

Результаты экспериментов.

Результаты определения фагоцитарной активности приведены в таблице №1.3.1.

Из таблицы видно, что применение средства «ЛайфЛивер220» способствовало повышению процента фагоцитоза по сравнению с контрольными не леченными животными. То же следует сказать в отношении фагоцитарного числа, которое у животных, леченных препаратом (БАД) ЛайфЛивер220 приближалось к таковому в контроле (без CCL4).

Таким образом, приведенные материалы позволяют считать, что препаратом (БАД) ЛайфЛивер220 благотворно влияет на иммунную систему организма, подвергнутого действию CCL4, усиливая процент фагоцитоза и увеличивая фагоцитарное число.

Результаты определения фагоцитарной активности в ходе определения специфической активности препаратом (БАД) ЛайфЛивер220.

Таблица №1.3.1.

% фагоцитоза

Фагоцитарное число

До начала эксперимента

После введения CCL4 без лечения

До начала эксперимента

После введения CCL4 без лечения

7

64

28

3,0

0,6

8

61

32

3,1

1,4

9

57

48

2,9

3,0

M

60,6

36

3,0

1,7

±m

2,22

0,72

0,1

0,8

 

 

С лечен.

 

С лечен.

2

58

58

3,5

4,3

3

60

56

2,8

3,1

4

64

60

3,0

2,8

5

61

60

3,1

3,9

6

57

52

2,9

4,0

M

60

57,2

3,1

3,6

±m

0,7

0,53

0,1

0,2

P

 

< 0,01

 

> 0,05

P- Разница между леченными и не леченными животными.

1.4.Состояние биохимических показателей крови.

Методика. У экспериментальных и контрольных животных брали кровь из краевой вены уха для определения следующих показателей:

А) общего количества белка сыворотки, который определяли рефрактометрическим методом;

Б) определение белковых фракций методом электрофореза на бумаге с последующим извлечением красителя из бумаги и калориметрического определения его количества;

В) определение общих липидов;

Г) определение креатина;

Д) определение ферментов крови- глутамикоаспарагиновой аминотрансферазы (АСТ) и, глютамикоаланиновой аминотрансферазы (АЛТ). Эти ферменты определяли наборами реактивов фирмы “Лахема”.

Результаты исследования.

Полученные результаты приведены в таблицах № 1.4.2., 1.4.3., 1.4.4.

Белковый спектр крови животных с экспериментальным гепатитом и леченных препаратом (БАД) ЛайфЛивер220 приближается к нормальным для этого вида животных параметрам. В противоположность этому у контрольных животных отмечаются снижение общего количества белка и увеличение гамма-глобулиновой его фракции.

В показателях общих липидов, креатинина и сахара между леченными и не леченными животными существенные различия не установлены.

У леченных животных значительно снизилась активность АСТ, АЛТ и по сравнению с таковой у не леченных контрольных животных.

Таким образом, результаты биохимических исследований показывают, что препарат (БАД) ЛайфЛивер220 у животных с экспериментальным гепатитом увеличивает содержание общего белка крови, уменьшает величину глобулиновой фракции и снижает ферментативную активность крови.

Динамика изменения количества общего белка и его фракции в ходе определения специфической активности препарата (БАД) ЛайфЛивер220.

Динамика изменения количества общего белка и его фракции в ходе определения специфической активности препарата (БАД) ЛайфЛивер220.

Таблица №1.4.1.

Общий г% белка

Альбумин г %

Глобулины г %

a

b

y

Опыт (с лечением) n=5

2

6.2

53.0

12.0

17.5

20.0

3

6.2

48.8

13.8

15.4

22.1

4

6.8

51.4

15.4

15.5

17.7

5

6.9

47.4

14.4

19.1

19.1

6

6.8

52.0

15.0

16.4

16.6

6.58±0.5

50.5±2.3

14.1±1.83

16.8±1.6

19.1±2.9

D

-0.15

+1.5

+0.1

+1.5

-2.5

m

0.3

1.34

0.81

0.71

1.3

t

0.27

1.6

0.12

1.36

1.78

p

<0.05

>0.1

>0.1

>0.1

<0.05

Контроль (без лечения) n=3

7

6.9

48.2

14.1

17.0

20.7

8

5.1

50.0

14.2

14.0

22.0

9

5.2

49.0

13.8

15.0

22.2

5.73±0.8

49.0±0.9

14.0±0.21

15.3±1.5

21.6±0.82

D

----

----

----

----

----

m

0.47

0.57

0.12

0.88

0.48

t

----

----

----

----

----

p

----

----

----

----

----

Динамика изменения количества общих липидов, креатинина и сахара сыворотки крови кроликов в ходе определения специфической активности препарата ЛайфЛивер220.

Таблица №1.4.2.

Общие липиды г\л

Креатинин мкмоль\л

Сахар ммоль\л

Опыт (с лечением) n=5

2

4.40

177.0

8.0

3

2.64

177.0

8.6

4

7.44

177.0

7.0

5

8.48

141.6

8.0

6

7.68

126.9

8.0

6.13±3.5

160±34.0

7.9±0.82

D

-3.63

+6.3

-0.7

m

2.1

20.0

0.48

t

1.4

0.7

0.64

p

>0.2

<0.5

>0.5

Контроль (без лечения) n=3

7

11.20

159.3

7.0

8

12.80

159.0

8.2

9

5.28

141.6

10.5

9.76±2.6

153±10.1

8.6±1.8

D

----

----

----

m

1.5

6.0

1.05

t

----

----

----

p

----

----

----

Активность аспарагиновой аминотрансферазы (АСТ; 2.6.1.1.) в ходе определения специфической активности препарата (БАД) ЛайфЛивер220.

Таблица № 1.4.3.

Исходно

После введения CCL4

n=8

С лечен. n=5

Без леч. n=3

2

0,56

0,43

----

3

0,70

0,60

----

4

0,95

0,75

----

5

0,60

0,50

----

6

0,70

0,55

----

7

0,80

----

0,80

8

0,70

----

0,80

9

0,60

----

0,60

M

0,70

0,57

0,73

±m

0,15

0,01

0,11

P

----

----

> 0,05

P= различие между леченными и не леченными животными.

Активность аланиновой аминотрансферазы (АЛТ; 2.6.1.2.) в ходе определения специфической активности препарата (БАД) ЛайфЛивер220.

Таблица №1.4.4

Исходно

После введения CCL4

 

n=8

С лечен. n=5

Без леч. n=3

2

0,55

0,30

----

3

0,40

0,25

----

4

0,65

0,45

----

5

0,70

0,45

----

6

0,35

0,15

----

7

0,45

----

0,45

8

0,35

----

0,40

9

0,50

----

0,60

M

0,49

0,32

0,48

±m

0,06

0,13

0,07

P

----

> 0,05

> 0,1

P- различие между леченными и не леченными животными.

 
1.5. Состояния биофизических показателей.

Методика. С помощью метода электронного парамагнитного резонанса (ЭПР) исследовали парамагнитные центры, характеризующие антиоксидантные свойства крови, пролиферационную и кроветворную способность селезенки, состояние цепи электронного транспорта митохондрий и детоксицирующей системы печени. Спектры ЭПР образцов тканей регистрировались на радиоспектрометре РЭ – 1307 при температуре жидкого азота (-180°С).

Результаты экспериментов.

Результаты экспериментов приведены в таблицах № 1.5.1.- 1.5.3.

При сопоставлении данных леченных и не леченных животных можно заключить, что препарат (БАД) ЛайфЛивер220 характеризуется стабилизирующим действием на мембранные структуры печени, о чем свидетельствует восстановление целостности цепи электронного транспорта митохондрий на НАД , убихинон- оксидоредуктазном участке и снижение содержания ионов “свободного” печени больных гепатитом кроликов; Препарат (БАД) ЛайфЛивер220 способствует восстановлению и более того, активации детоксицирующей функции печени, снижению активации ПОЛ и восстановлению антиоксидантных свойств крови; способствует восстановлению активности процессов пролиферации и кроветворения в организме (селезенке) кроликов.

Изменение интенсивности сигнала ЭПР окисленного церулоплазмина (g=0.05; I) в ходе определения специфической активности препарата (БАД) ЛайфЛивер220.

Таблица № 1.5.1.

Условия №

Не леченные

Леченные

7

8

9

2

3

4

5

6

Цп g=2.05

17.0

15.5

16.5

10.0

15.0

13.5

10.5

12.5

Среднее

17.0±1.5

12.3±2.01

Контр.

12.8±17.0

Изменение интенсивности сигналов ЭПР селезенки (I)

Таблица 1.5.2.

 

RR (g=2.005)

Tp (g=4.3)

Не лечен.

7

0

36,7

8

11,7

35,0

9

0

34,8

Среднее

3.2±6.8

35.5±1.04

Леченные

2

15,2

46,0

3

20,0

48,0

4

18,6

47,2

5

25,5

48,1

6

28,0

49,0

Среднее

21.5±5.2

47.7±1.13

Контроль

 

20.5±3.5

48.2±2.0

Изменения интенсивности сигналов ЭПР печени (I)

Таблица № 1.5.3.

 

Свободные радикалы g=2

ЖСЦ g=1.94

ЖСЦ-NO g=2.03

Mn2+ компл.g=2.14

Цит. P-450g=2.25

I

˄H

Не лечен.

7

57,2

9,8

15,2

3,4

5,4

15,0

8

43,0

10,6

15,0

3,5

5,3

15,6

9

57,2

9,7

13,0

3,2

5,7

16,2

M

52,4

10,0

14,6

3,4

5,5

15,6

±m

4,19

0,49

1,04

0,15

0,2

0,6

Леченные

2

33,4

12,3

22,5

3,0

3,6

8,0

3

38,4

12,0

26,8

3,8

3,4

7,8

4

37,6

11,4

21,3

3,0

3,0

7,5

5

36,4

12,0

22,3

3,2

3,2

7,2

6

36,0

12,2

24,0

3,3

3,3

7,2

M

36,4

12,0

23,4

3,3

3,3

7,5

±m

1,90

0,34

2,14

0,32

0,22

0,36

Исходно

M

32,3

12,1

20,7

3,4

3,6

10,5

±m

1,48

0,14

0,99

0,21

0,57

0,71

1.6. Патоморфологические и гистоструктурные изменения.

Подвергнуты эвтаназии путем декапитации:

1) Кролики №2,3,4,5,6; леченные ежедневным введением рег os препарата (БАД) ЛайфЛивер220 в дозе 9.84 мг\кг в течение 9 дней после 8-и кратного перорального введения четыреххлористого углерода в дозе 0.25 мл в течение 28 дней (по два раза в неделю).

2) Кролики №7,8,9 не леченные после 8-и кратного перорального введения CCL4 в дозе 0.25 мл в течение 28 дней 9по два раза в неделю).

Патоморфологическая картина леченных кроликов идентична во всех случаях. Для примера приводим протокол вскрытия кролика № 2.

На секции: внутренние органы расположены правильно. Ткани бледно- розового цвета. Жировая ткань выражена нормально. В плевральной и брюшной полостях жидкости нет, налетов, кровоизлияний и изъязвлений не отмечается. Брюшина бледная, анемичная. Печень не увеличена, неплотная, капсула снимается легко, поверхность бледнее нормальной, тусклая, шероховатая. Печень дрябловатая, на разрезе вытекает мало крови, соскоба в трех случаях из пяти. Селезенка сморщенная, грязно- темно- коричневого цвета, тусклая, дряблая, на разрезе дает незначительный соскоб. Почки не увеличены, бледноватые, тусклые, капсула снимается легко соскоба на разрезе не дают, поверхность желтая, кровоизлияний не отмечается.

Легкие: бледноватые, вздутые. В двух случаях из пяти на разрезе вытекает пенистая, кровянистая жидкость. Кровоизлияний нет. Сердечная мышца слегка дряблая, коронарные сосуды полнокровны, в полостях жидкости нет. Поверхность чистая, кровоизлияний нет. Желудочно- кишечный тракт: Слабо выраженная анемия ткани, слизистая бархатистая, бледно- розового цвета, складчатость желудка сохранена. Кровоизлияний и изъязвлений нет. Тимус не увеличен. Мочевой пузырь полный, моча прозрачная. При разрезе крупных сосудов вытекающая кровь сворачивается в сгустки.

Патоморфологическая картина не леченных кроликов также идентична во всех случаях . Приводим для примера протокол вскрытия кролика №8.

На секции: внутренние органы расположены правильно. Ткани бледные, анемичные. Жировая ткань отсутствует. В плевральной и брюшиной полостях жидкости нет. Налетов, кровоизлияний и изъязвлений не отмечается. Брюшина бледная, тусклая, сосудистый рисунок едва просматривается. Печень- уменьшена в размере, дряблая, капсула снимается легко, анемичная. Желчный пузырь в двух случаях из трех продавил паренхиму печени, которая легко рвется. На разрезе кровь не вытекает, дает обильный соскоб. Сосудистый рисунок мало выражен. Селезенка- увеличена, почти черного цвета, застойная, тусклая, на разрезе вытекает много крови, дает значительный соскоб. Почки не увеличены, анемичны, дряблые, капсула снимается легко, на разрезе соскоба не дает. Легкие- эмфизематозное расширены, на разрезе вытекает пенистая кровь с темно- синюшным оттенком. Сердечная мышца дряблая, желудочки пустые. Предсердия переполнены не свернувшейся жидкой кровью. Тимус увеличен в одном случае, в двух случаях атрофичен. Желудочно- кишечный тракт: анемичен. Ткани дряблые, анемичные. Складки слизистой желудка выражены нормально. Кровоизлияний и изъязвлений нет. Мочевой пузырь полный, моча прозрачная.

При разрезе крупных сосудов вытекающая кровь не сворачивается, она гемолизированна.

1) Гистологическая картина кроликов получавших CCL4 и леченных препаратом (БАД) ЛайфЛивер220.

Сердечная мышца- миокардиоциты воспринимают красители, незначительная степень вакуолизации саркоплазмы. Хорошо выраженная поперечно- полосатая исчерченность. Гиалиноз стенок сосудов, вены переполнены кровью. Незначительная складчатость интимы стенок артерии, гемолиз не наблюдается.

Легкие альвеолы нормальной величины, местами расширены, разрыв капилляров и очаги кровоизлияния в легочной ткани. Незначительная перибронхиальная лимфоцитарная инфильтрация.

Тимус- огромное количество лимфоцитов скоплениями, при окраске дают темный фон. Эозинофилы не встречаются, уменьшение жировой инфильтрации.

Селезенка- степень отечности уменьшена, расширение синцссоиды, содержат большое количество эритроцитов и малых лимфоцитов.

Почки- разволокнение структур не наблюдается, местами набухание и вакуолизация эпителия почечных канальцев. В гломерулах эритроциты не наблюдается. Признаков нарушения кровообращения нет.

Печень- в большинстве гепатоцитах наблюдается зернистость, в некоторых отмечается вакуольная дистрофия, появляется упорядоченность печеночных балок. Портальные тракты расширены разрестающей соединительной тканью с лимфоцито- макрофагальной инфильтрации. Вены расширены, с пристеночным прилипанием эритроцитов.

2) Гистологическая мышца- отек стромы, вакуольная дистрофия миокардиоцитов, местами кариопикноз- с некролизом, признаки гемолиза, гиалиноз артериальных стенок, сморщивание и складчатость эндотелия. Просветы магистральных сосудов заполнены кровью.

Легкие- альвеолы расширены, стенки утолщены, стазирование крови в капиллярах, гиалиноз стенок артерии и складчатость интимы. Просветы переполнены кровью.

Тимус- отек стромы. Ожирение между септами выражено ярко. Между жировыми клетками большое количество эозинофилов и макрофагов. В корковом веществе огромное количество лимфоцитов которые усиленно воспринимают красители.

Селезенка- отек стромы и капсулы. Некроз лимфоцитов в красной пульпе, стазирование крови.

Почки- гидролическая дистрофия, стаз в капиллярах. Стенки артерий утолщены. Некроз и слущивание эпителия концевых извитых канальцев.

Печень- гидролическая дистрофия в гепатоцитов. Они заполнены вакуолями среди которых плавает пикнотическое ядро, или уже в состоянии карио лизиса. Портальные тракты расширены, стенки сосудов утолщены, дискомплексация балок с отдельными участками некролиза.

 
Заключение.

Анализ приведенного сравнительного материала животных с экспериментальным гепатитом, леченных препаратом (БАД) ЛайфЛивер220 и не леченных, позволяет сделать вывод о положительном лечебном действий этого средства при экспериментальном гепатите.

Препарат (БАД) ЛайфЛивер220 способствовало устранению гипопротеинемии, гипоальбуминемии, уменьшило гипергаммаглобулинемию, увеличило количество лейкоцитов, уменьшило трансаминазную активность, повысило клеточный иммунитет, улучшило общее состояние животных, из безусловные рефлексы и реакции на внешние раздражители.

Как известно, роль печени в организме велика и разнообразна. В ней широко представлены процессы биосинтеза и расщепления всех важнейших в биологическом отношении соединений, осуществляется синтез ДНК и РНК, различных ди и мононуклеотидов, пуриновых и пирамидиновых оснований. В то же время в печени присутствуют ферменты, благодаря которым нуклеиновые кислоты и нуклеотиды подвергаются расщеплению, а свободные пуриновые основания- дезаминированию и окислению и таким образом служат источником для образования оксипуринов и, в частности, мочевой кислоты. В печени происходит синтез белка, начинал с активации аминокислот в гиалоплазме, образования соединений со специфическими для каждой аминокислоты транспортными РНК и кончая завершающей стадией синтеза высвобождением длинных пептидных цепей готовых белков из места из образования в полисомах. Важно что в печени образуются белки, характерные не только для нее самой, но и белки кровяной плазмы- альбумины, многие глобулины, фибриноген и другие факторы, участвующие в процессе свертывания крови. Под влиянием катептических протеаз и пептидаз в печени происходит расщепление белков и образование аминокислот. Вместе с аминокислотами, принесенными кровью, они представляют тот метаболический фон, из которого организм черпает нужные ему соединения для процесса обмена веществ. В печени аминокислоты подвергаются различным превращениям: переаминированю, дезаминированию, декарбоксилированию, приводящему к образованию биогенных аминов. Велика роль печени в процессах обезвреживающего синтеза, направленных на нейтрализацию токсических продуктов. В печени происходит процессы синтеза и распада углеводов, деградация жира и жирных кислот, а также в ней представлены ферментные системы биосинтеза высокомолекулярных жирных кислот, нейтрального жира и сложных липоидов. Она играет существенную роль в пигментном обмене организма, в минеральном водно- солевом обмене, в сохранении постоянства кислотно- щелочного равновесия, а так же в обмене ряда витаминов.

В условиях воспитательных, дэструктивных, токсических и других процессов в печени страдают все ее функции, что сказывается на организме в целом.

При сравнении биохимических показателей контрольных здоровых кроликов и кроликов подвергнутым токсическому воздействию четыреххлористым углеродом обращает на себя внимание наличие у последних анемии, гипергаммаглобулинемии, при явлениях гиперпротеинемии и падения количества альбуминов сыворотки крови. Активность ферментов сыворотки крови заметно повышена. Повышения активности трансаминаз, как глютамикоаспарагиновой (АСТ), так и глютамикоаланиновой (АЛТ) свидетельствует о наличии дэструктивных процессов в клетках печени. Иммунологические показатели сыворотки крови отражают явления угнетения иммунной системы у экспериментальных кроликов. Антиоксидантная активность снижена. Микроструктурным анализом подтверждено наличие деструктивно- дегенеративных процессов в паренхиме печени.

Сравнительный анализ биохимических, гематологических, биофизических, иммунологических, патоморфологических и гистологических изменений, отмечаемых у леченных и не леченных животных позволяет сделать вывод о том, что применение с лечебной целью препарата (БАД) ЛайфЛивер220 в тарапевтических дозах в течение 9 дней значительно улучшает изученные показатели. У леченных животных отмечались после начала лечения прибавка в весе, повышение спонтанно- двигательной активности, живые безусловные рефлексы с латентным периодом исходной продолжительности, адекватные реакции на внешние раздражители, активное сопротивление проводимым манипуляциям. В противоположность леченным кроликам, у не леченных прогрессировало потеря массы тела, углублилась малоподвижность, вялость безусловных рефлексов и торпидность реакций на внешние раздражители. Эти кролики поедали лишь зеленый корм и овощи, отказывались от сухого корма, потребляли много воды.

У леченных препаратом (БАД) ЛайфЛивер220 кроликов по сравнению с не леченными отмечали уменшение количества общего белка сыворотки плазмы, нарастание альбуминовой при снижении гаммаглобултиновой фракции белка, снижение активности АСТ и АЛТ, нарастание количества эритроцитов и гемоглобина в периферической крови, уменьшение имунно- депрессивного состояния, повышение антиоксидантной активности. На секции явления экспериментального гепатита у леченных животных выражены меньше, чем у не леченных.

Увеличение печени не отмечается, она не плотная, капсула не натянута, поверхность гладкая, блестящая, на разрезе соскоба не дает. Рисунок четкий, кравоснабжение достаточное. Перитониальная брюшина влажная, блестящая, гладкая, прозрачная, без налетов, изъязвлений и кровоизлияний; сосудистый рисунок не изменен.

Приведенные сравнительные материалы результатов исследования кроликов с экспериментальным гепатитом, леченных препаратом (БАД) ЛайфЛивер220 и не леченных, позволяют сделать вывод о наличии препарата (БАД) ЛайфЛивер220 благотворного гепатотропного действия, что является обоснованием для целесообразности применения препарата (БАД) ЛайфЛивер220 при заболеваниях печени дистрофического характера.